吴茱萸不同炮制品中挥发油成分气相色谱—质谱分析

学生药系张贵君教授鉴定为毛茛科植物黄连Coptis chinensis Franch.的干燥根茎；食盐（中盐北京盐业公司），米醋（北京龙门和田宽食品有限公司），黄酒（浙江绍兴县醇雕酒业有限公司），生姜（市售）。无水硫酸钠（分析纯，北京化学试剂三厂）。

2 方法与结果

2.1 样品的制备

2.1.1 生品 取吴茱萸，除去枝梗等杂质，得净吴茱萸。

2.1.2 清水炙品 净吴茱萸100 g中加入适量去离子水，拌匀，闷润至吸尽，置炒锅内，文火炒干，取出，摊开晾凉，得清水炙吴茱萸。（同时记录炒制温度和炒制时间，其他炮制品皆按此温度和时间进行炒制。）

2.1.3 各炮制品 参照2015年版《中华人民共和国药典》炙法制备甘草炙吴茱萸；制备盐水、姜汁（生姜压榨汁）、黄连汁、稀释米醋、稀释黄酒，分别按照清水炙品的炮制操作方法制备各炮制品，得盐炙吴茱萸、姜炙吴茱萸、黄连炙吴茱萸、醋炙吴茱萸、黄酒炙吴茱萸。

2.2 供试品溶液制备

参照2015年版《中华人民共和国药典》（一部）附录ⅩD挥发油测定法甲法提取挥发油。称取吴茱萸及炮制品各50.00 g，置挥发油提取器中，加水500 mL，浸泡过夜，加热并保持微沸状态8 h，收集挥发油，用无水硫酸钠脱水，得黄色挥发油。各样品挥发油用乙醚稀释后，过0.22 μm滤膜，备用。生品、清水炙、甘草炙、盐炙、醋炙、姜炙、黄酒炙、黄连炙吴茱萸挥发油得率分别为0.71%、0.63%、0.51%、0.59%、0.59%、0.69%、0.63%、0.65%。

2.3 气相色谱-质谱条件

2.3.1 色谱条件 色谱柱为DB-5石英毛细管色谱柱（30 m×0.25 mm×0.25 μm）；进样量：1 μL；进样口温度240 ℃，传输线温度250 ℃；程序升温：40～220 ℃（3 ℃/min）；分流比：40∶1；载气为高纯氦气，流量1.0 μL/min。

2.3.2 质谱条件 EI离子源；电离能量70 eV；离子源温度：200 ℃；加速电压：200 eV；扫描范围：40～500 amu。

2.4 挥发油成分鉴定

吴茱萸生品含挥发油0.71%，经炮制后，挥发油含量均有所降低，不同炮制品中挥发油含量由高到低依次为：姜炙品>黄连炙品>黄酒炙品=清水炙品>醋炙品=盐炙品>甘草炙品。说明辅料会影响吴茱萸中挥发油的含量。

用GC-MS分析吴茱萸生品及各炮制品的挥发油，得其总离子流色谱图。通过检索质谱计算机数据系统（质谱数据库NIST.NBS），确认化合物；按峰面积归一化法计算各化合物在挥发油中的相对百分含量，结果见表1。生品中共检测出58个峰，鉴定出57个化合物；清水炙品中共检测出56个峰，鉴定出54个化合物；甘草炙品中共检测出53个峰，鉴定出52个化合物；盐炙品中共检测出51个峰，鉴定出49个化合物；醋炙品中共检测出56个峰，鉴定出52个化合物；黄酒炙品中共检测出57个峰，鉴定出53个化合物；姜炙品中共检测出57个峰，鉴定出53个化合物；黄连炙品中共检测出58个峰，鉴定出54个化合物。

3 讨论

与生品相比，吴茱萸各炮制品中含量下降明显或消失的成分大多集中在30～60 min。此区域内的成分有：乙酸金合欢酯、β-石竹烯、α-石竹烯、β-花柏烯、喇叭茶醇、α-桉叶烯、正十五烷、9，11（12）-荜澄茄二烯、橙花叔醇、4-甲基-正十五烷、对-斯巴醇、正十六烷、马兜铃烯、表蓝桉醇、邻苯二甲酸二异丁酯、棕榈酸等。由于挥发油是吴茱萸的主要毒性成分，炮制后吴茱萸的毒性降低，因此推测吴茱萸挥发油中的主要毒性成分以该部分为主。在此区域的挥发油中，有研究显示石竹烯给小鼠灌胃后有亚急性毒性[9-10]。

本试验中特引入了清水炙品，即炮制工艺流程与其他炙品相同，但炮制辅料为水。清水炙品的设置可对照性地阐释辅料在吴茱萸炮制中起到的作用。清水炙品与生品共有成分45个，吴茱萸清水炙后减少了13个成分，增加了12个成分，这些成分的变化主要与炮制过程有关，翻炒受热可能是引起变化的主要影响因素。盐炙品较清水炙品减少了8个成分，增加了3个成分，两者共有成分48个。醋炙品较清水炙品减少了6个成分，增加了6个成分，两者共有成分50个。黄酒炙品较清水炙品减少了9个成分，增加了10个成分，两者共有成分47个。姜炙品较清水炙品减少了10个成分，增加了11个成分，两者共有成分46个。黄连炙品较清水炙品减少了11个成分，增加了13个成分，两者共有成分45个。甘草炙品较清水炙品减少了19个成分，增加了16个成分，两者共有成分36个。参照韦氏等[11]建立的相似度计算方法，各炮制品中挥发油与生品的相似度从大到小依次为：清水炙品>盐炙品>醋炙品>黄酒炙品≈姜炙品>黄连炙品>甘草炙品。清水炙品与生品的相似度最高，各炮制品与生品的相似度均比清水炙品低，可见辅料会影响吴茱萸中挥发油成分的组成。生品及各炮制品中共有的成分共22个，生品有3个独有成分，甘草炙品中有5个独有成分，盐炙品中有1个独有成分，黄酒炙品中有2个独有成分，姜炙品中有3个独有成分，黄连炙品中有3个独有成分，清水炙品、醋炙品中无独有成分。不同的辅料对于吴茱萸中挥发油成分的影响不同，其中甘草产生的影响最为显著。

参考文献：

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[2] 李红霞.吴茱萸汤在妇科临床的应用[J].中国中医药信息杂志，2009， 16（7）：83.

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[7] 王易宾，黄慕斌.吴茱萸炮制前后挥发油成分的研究[J].中药材， 1992，15（6）：18-20.

[8] 张韬，张世臣，魏璐雪.中药吴茱萸炮制前后挥发油成分分析[J].中国中药杂志，1994，19（6）：341-343.

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[10] 赵文红，厉曙光.DEHP染毒后小鼠各脏器含量的测定及其意义[J].中国卫生检验杂志，2005，15（3）：262-263，292.

[11] 韦建荣，马银海.Excel与中药指纹图谱相似度计算[J].昆明师范高等专科学校学报，2007，9（4）：110-112.

（收稿日期：2015-11-12）

（修回日期：2016-01-07；编辑：陈静）

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