摘要Southern杂交技术作为分子生物学中的经典技术，为特定DNA片段的检测提供了快速、准确、灵敏的方法。在植物遗传转化研究中，Southern杂交技术广泛应用于外源基因的检测及拷贝数的鉴定工作，为植物转基因研究的准确性提供了充分的保障。综述了Southern杂交技术在水稻、玉米、小麦、大豆等主要农作物遗传转化研究中的应用，可为农作物转基因研究方法的明确及转基因食品安全检测方法的探索提供参考。
关键词Southern杂交;农作物;遗传转化;外源基因检测
中图分类号S188文献标识码A文章编号0517-6611（2015）01-020-04
Application of Southern Blot in the Genetic Transformation of Crops
DAI Jun
（Liaoning National Normal College， Fuxin， Liaoning 123000）
AbstractAs one of classical techniques of molecular biology， Southern blot provides a fast， accurate and sensitive method for the detection of specific DNA fragments. In the research of genetic transformation in plants， Southern blot is widely used in the detection of genetic transformation and identification of gene copy number. It provides adequate safeguards for the accuracy of transgenic research. This paper summarizes the application of Southern blot in the staple crops， such as rice， maize， wheat， soybean， etc.， which provides references for the definitude of the ways for studying genetic transformation， as well as the explore of the ways for detecting genetically modified food safety.
Key wordsSouthern blot; Crops; Genetic transformation; Detecting exogenous gene
基金项目国家林业公益性行业专项资助项目（200904064）。
作者简介代军（1965- ），女，辽宁阜新人，副教授，从事农业生物技术方面的研究。
收稿日期20141112
Southern杂交技术由英国科学家埃德温·迈勒·萨瑟恩（E.M.Southern）于1975年创立，此技术现已成为检测特定DNA片段的经典方法[1]。该方法利用硝酸纤维膜或尼龙膜等可以吸附DNA的功能，将DNA电泳后的DNA区带吸附到膜上，随后在膜上进行同位素标记探针与被测DNA之间的杂交，最后通过放射自显影对杂交结果进行检测，以此探测DNA 样品中含有的特定DNA信息[2]。Southern杂交技术特异性强，灵敏性高，可应用于检测样品中DNA及其含量，了解基因的状态，如是否存在点突变、扩增重排等，在遗传病诊断、外源基因检测、DNA图谱分析、PCR产物分析等方面均有广泛应用。随着Southern杂交技术的不断成熟，其越来越多地被应用到农作物基因工程基础研究和转基因育种中。
《种子法》规定，水稻、小麦、玉米、棉花、大豆为主要农作物。此外，油菜和马铃薯也被列为主要农作物的范畴。笔者针对主要农作物，综述了Southern杂交技术的应用情况，旨在总结Southern杂交技术在作物分子生物学基础研究和遗传育种中的主要作用及趋势，为更清晰地了解和利用Southern杂交技术提供重要参考。
1Southern杂交技术在水稻中的应用
水稻（Oryza sativa L.）是世界上最重要的粮食作物之一，由于其基因组相对较小，遗传转化体系成熟，已逐渐成为作物分子遗传及基因组研究的模式植物[3]。Southern杂交技术在水稻基因工程研究中起着十分重要的作用，是转基因水稻最为重要的一种检测手段[4]。孙崇荣等[5]利用32P标记的探针进行Southern杂交，验证了水稻叶绿体基因也能编码自身的RNA聚合酶。李宝健等[6]利用电注射法导入外源基因获得转基因水稻植物，通过Southern杂交技术，证实了外源基因在此转化体系中得到了稳定的表达。GUS基因在水稻中的表达[7]、转抗菌肽B基因[8]、抗除草剂转基因水稻[9]、GUS和HPT基因在水稻中的共表达[10]等都是通过Southern杂交技术来验证其转入的整合稳定性。金危危等[11]，徐晓辉[12]，王嵘等[13]，王为民等[14]，张启军等[15]，李聪等[16]，汪小福等[17]，罗伯祥等[18]，向殿军等[19]在水稻转基因等方面的研究也是利用Southern杂交技术作为主要手段进行外源基因检测的。此外，电注射法、低能离子束介导法[20]、基因枪法[21]、水稻花粉管导入法 [22]、根癌农杆菌介导法[23-26]等转基因方法的发明与完善，都是利用Southern杂交技术进行验证的。
2Southern杂交技术在玉米中的应用