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动物源性食品中呋喃它酮代谢物酶联免疫检测方法的建立

时间:2022-11-05 19:45:08 来源:网友投稿

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3.2.4特异性的测定

采用间接竞争ELISA法检测,AMOZ-2F7抗体与NPAHD、NPAOZ、NPSEM、4-CBA的交叉反应率均小于0.01%,证明单抗与其他几种结构类似物不发生反应,该方法具有很高的特异性。

4结论

呋喃它酮属于小分子物质,没有免疫原性,所以在抗体制备过程中用对羧基苯甲醛将其衍生成CPAMOZ,再通过活化酯法将其衍生物与大分子载体蛋白进行连接,使其具备免疫原性。小分子抗原在雜交瘤细胞筛选过程中常出现效价高、敏感性差的结果。本实验用不同批次免疫原多次免疫、多次融合,以提高分泌强阳性、高抑制抗体的融合细胞数量。经过筛选,最终得到1株稳定分泌抗体的细胞,单抗AMOZ-2F7经检测,效价达到1:1×106。将该抗体应用于ELISA方法检测,在0.0975-6.25μg/L范围呈现较好线性,ICso为1.011μg/L,与其他结构类似物无交叉反应。本研究得到的抗体特异性好、敏感性高,建立了ELISA检测方法,呈现较好性能,为免疫学检测技术研究和动物源性食品中兽药残留的快速检测奠定了基础。

(作者单位:河北省科学院生物研究所)

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