【摘要】 目的 探讨血浆8-异前列腺素F2а(8-iso-prostaglandin F2α,8-isoPGF2α)水平与早期糖尿病肾病的关系及临床意义。方法 选择2型糖尿病患者63例,分为单纯糖尿病组(22例)和早期糖尿病肾病组(41例);以同期健康查体者31例作为正常对照组,用ELISA法检测3组血浆8-isoPGF2а水平,并进行统计学分析。结果 单纯糖尿病组、早期糖尿病肾病组和对照组患者血浆8-isoPGF2а水平分别为(394.5±104.1)pg/ml、(562.7±211.8)pg/ml和(292.7±66.7)pg/ml,组间比较差异有统计学意义(F=13.907,P<0.001)。与对照组比较,单纯糖尿病组及早期糖尿病肾病组8-isoPGF2а水平显著升高,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.001);与单纯糖尿病组比较,早期糖尿病肾病组8-isoPGF2а水平明显升高,差异有统计学意义(P=0.001)。血浆8-isoPGF2а水平与HbA1c呈显著正相关(r=0.349,P=0.012)。结论 2型糖尿病肾病早期氧化应激水平明显增加,检测血浆8-isoPGF2а水平对于预测早期糖尿病肾病可能具有一定临床意义。
【关键词】 2型糖尿病;糖尿病肾病;8-iso-prostaglandin F2а;氧化应激
Study of clinic significance and the relationshipbetween plasma 8-iso-prostaglandin F2аand early stage diabetic nephropathy
PEI Wei,PANG Li-nan,LIU Lin,et al.
Weifang Medical College,Weifang 261042,China
【Abstract】 Objective To study the relationship between plasma 8-isoPGF2αand early stage diabetic nephropathy and analyze it"s clinic significance.Methods 63 patients with type 2 diabetes mellitus (DM) were divided into 2 groups according to the value of urinary albumin excretion rate (UAER):①simple DM group (SDM,UAER<20μg/min),22 cases;②early diabetic nephropathy (EDN,UAER20～200μg/min),41 cases.The plasma level of 8-isoPGF2αwas measured in the type 2 DM patients of 2 groups and 31 normal controls(NC)by ELISA.Results ①The plasma level of 8-isoPGF2αin patients with SDM,EDN and NC groups were(394.5±104.1)pg/ml、(562.7±211.8)pg/ml and(292.7±66.7)pg/ml, respectively.Significant difference was found among the 3 groups (F=13.907,P<0.001)②Compared to NC group, the level of 8-isoPGF2αwas markedly high in SDM and EDN groups (P<0.05,P<0.001).Further more,the level of 8-isoPGF2αwas higher in EDN than SDM (P=0.001)③ There was a significant positive correlation between 8-isoPGF2αand HbA1c(r=0.349,P=0.012).Conclusion The plasma level of 8-isoPGF2αwas significantly elevated in EDN.Measurment of plasma 8-isoPGF2αseems to be helpful for early diagnosis of diabetic nephropathy.
【Key words】 Type 2 Diabetes mellitus; Diabetic nephropathy; 8-iso-prostaglandin F2а; Oxidative stress
高血糖引起的氧化应激是糖尿病肾病(diabetic nephropathy)发生与发展的重要机制之一。糖尿病肾病的早期诊断,对防治糖尿病肾病有重要意义。既往临床常用尿白蛋白排泄率作为早期诊断指标,但是它的特异性及敏感性均有限[1]。近年来,人们发现了一类前列腺素F2异构体,命名为异前列腺素F2 (Isoprostane F2)。它是通过非环氧化酶催化氧自由基分解途径,损伤脂质细胞膜花生四烯酸后的产物[2]。其中8-异前列腺素F2а(8-iso-prostaglandin F2α,8-isoPGF2α)是异前列腺素F2的主要和稳定成分,具有收缩肺、肾、冠状动脉、脑血管和视网膜动脉,以及促进血小板粘附和聚集等生物活性[3,4]。目前被认为是判断活体内氧化应激程度最理想的生化指标[5]。大量研究表明[6,7,8],2型糖尿病患者血浆及尿中8-isoPGF2а水平明显升高。本研究选择单纯2型糖尿病与早期糖尿病肾病患者,检测其血浆8-isoPGF2а的水平,旨在探讨血浆8-isoPGF2α水平与早期糖尿病肾病的关系及临床意义。
1 资料与方法
作者单位:261042潍坊医学院(裴薇 吴琰 张金华);
潍坊市人民医院内分泌科(逄力男 柳林)
1.1 一般资料 选取2009年5月至2009年8月潍坊市人民医院内分泌科住院的2型糖尿病患者63例(1999年WHO糖尿病诊断标准),其中男39例,女24例,年龄29～77岁,平均(52±15)岁,病史2个月～26年,平均7.9年。根据24 h尿白蛋白排泄率(UAER)分为:单纯糖尿病组(UAER<20μg/min)22例;早期糖尿病肾病组,即微量蛋白尿组(UAER20～200μg/min)41例。健康对照组31例,其中男18例,女13例,年龄(38±12)岁,均来自本院体检中心健康体检者。所有受试者均排除糖尿病急性并发症、感染、肿瘤、妊娠、心肺疾病、肝脏疾病等。
1.2 方法 ①均由专人测量所有受试者的身高(m)、体质量(kg)、血压(mm Hg),计算体质量指数(BMI=kg/m2);②UAER:留取24 h尿混匀后记录尿总量,散射比浊法测尿微量白蛋白,计算UAER,重复测2次取平均值;③空腹8～12 h取肘静脉血,采用酶法测定总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL-C)、高密度脂蛋白(HDL-C),采用高压液相色谱分析法测定HbA1c(试剂盒由美国伯乐公司提供),并留取血浆200 μl于-20℃保存,同批测定8-isoPGF2а水平;④8-isoPGF2α测定采用ELISA法(试剂盒由美国ADL公司提供),按说明书进行测定,灵敏度1.0 pg/ml。
1.3 统计学方法 所有数据采用SPSS 16.0软件包进行分析,各组数据均以x±s表示,统计方法均数间比较采用t检验和方差分析,相关分析采用Pearson相关分析和偏相关分析,P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 各组临床指标的比较(见表1) 与单纯糖尿病组比较,早期糖尿病肾病组糖尿病病程明显增加(P=0.007)。与对照组比较,单纯糖尿病组和早期糖尿病肾病组8-isoPGF2а水平显著升高,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.001);与单纯糖尿病组比较,早期糖尿病肾病组8-isoPGF2а水平明显升高,差异有统计学意义(P=0.001)。
2.2 相关性分析 经偏相关分析,两组2型糖尿病患者8-isoPGF2а水平均与HbA1c呈显著正相关(r=0.349,P=0.012)。
3 讨论
糖尿病早期肾脏对氧化应激具有高度敏感性,这是糖尿病肾病发生和发展的重要因素之一。高糖刺激下肾小球系膜细胞和肾小管上皮细胞产生过多的活性氧簇(ROS),攻击肾小球毛细血管基底膜磷脂发生脂质过氧化,使肾小球通透性增加,血浆蛋白易透过内皮细胞沉积于肾小球基底膜,致基底膜增厚,攻击红细胞膜发生脂质过氧化可使其对肾小球内皮细胞粘附性增强及变形能力降低,同时,上调转化生长因子-β(TGF-β)的表达,诱导细胞外基质的沉积[9]。
近年来发现,8-isoPGF2а是体内生成的具有一定生物活性的前列腺素样化合物,是氧自由基损伤脂质细胞膜上的花生四烯酸发生脂质过氧化作用后的特异性产物,具有收缩肺、肾、冠状动脉、脑血管和视网膜动脉,以及促进血小板粘附和聚集等生物活性[3,4]。8-isoPGF2а原位生成,释放入血,并从尿液中排出。由于其不依赖于环氧化酶,体内含量稳定,广泛存在于体液和各种组织中,其产生不受阿司匹林、消炎痛等药物的影响,也不受饮食中脂质成分的影响[10],被认为是判断活体内氧化应激程度和临床上评价抗氧化剂疗效的最理想的生化指标[5]。研究表明,8-iso-PGF2а与多种疾病如高血压、动脉粥样硬化、肥胖、缺血再灌损伤、哮喘、阿尔兹海默病、神经性损伤、血液透析、肾移植等密切相关,临床可通过检测体内8-iso-PGF2а的水平作为评估疾病严重程度的一项良好指标。
大量研究显示[6,7,8,12,13],2型糖尿病患者及动物模型血浆及尿8-isoPGF2а水平均有明显升高。另有实验证实,尿8-isoPGF2а与血糖存在线性正相关,认为高糖毒性促进了8-isoPGF2а的形成[8]。本研究发现2型糖尿病患者血浆8-isoPGF2а水平显著升高,其水平与HbA1c有正相关性,与上述研究结果一致,提示持续慢性高血糖可激活氧化应激反应使糖尿病及其血管并发症发生的风险增加。
MonteroA等研究证实,糖尿病鼠血浆和尿中8-isoPGF2а水平明显增加,且经抗氧化剂干预后,8-isoPGF2а水平显著下降,并有蛋白尿的改善和肾小球TGF-β表达的减少。抗氧化剂治疗后,8-isoPGF2а尿排泄水平下降程度要低于血浆浓度下降程度,推测肾小球可能是病理条件下8-isoPGF2а合成的主要靶点之一[12]。同样,Yoshida等研究也发现,糖尿病肾病鼠尿8-isoPGF2Аs水平较非糖尿病鼠明显增加,且尿微量白蛋白和尿8-isoPGF2а排泄水平呈显著正相关,推断尿中8-isoPGF2а浓度可以作为糖尿病肾病氧化损伤的直接标志物[13]。本实验结果显示,早期糖尿病肾病组患者体内8-isoPGF2а水平较单纯糖尿病组显著升高,差异有统计学意义,提示随着糖尿病病情的进展,2型糖尿病肾病早期氧化应激水平相应增加,检测血浆8-isoPGF2а水平对于预测早期糖尿病肾病可能具有一定临床意义。
目前检测8-iso-PGF2а的方法有多种,其中GC-MS(气相色谱-串联质谱测定法)灵敏度高,特异性强,但不易应用于大样本的临床、基础及流行病学研究[14]。而用ELISA法测定8-isoPGF2а的含量与用GC-MS测定的结果呈正相关性,由于测定方法简便、成本低廉,使临床上广泛开展8-isoPGF2а水平的检测成为可能[15]。但本研究囿于条件、病例所限,8-isoPGF2а对糖尿病肾病早期诊断的确切意义,以及在糖尿病肾病诊断上的特异性和敏感性等,尚需进一步评估。
参 考 文 献
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