对照组。应用ELISA法检测患者尿NGAL（uNGAL）水平，应用免疫速率散射比浊法检测血清Cystatin C水平，分析尿NGAL及血清Cystatin C水平与肾小球滤过率（GFR）之间的相关关系。结果 ①MA组、CN组患者尿NGAL和血清Cystatin C水平均较对照组升高，差异有统计学意义（P<0.01），其中CN组患者尿NGAL和血清Cysta tin C水平最高分别为（95.56±32.68）ug/L和（4.73±1.62）mg/L。②Pearson相关分析：糖尿病患者尿NGAL和血清Cystatin C水平与GFR均呈负相关（r值分别为-0.312和-0.412，P<0.05），且尿NGAL与GFR的相关性更密切。结论 糖尿病患者尿NGA与GFR有较好的相关性，尿NGAL和血清Cystatin C是诊断早期DN敏感而准确的指标，有望用于临床监测。
关键词：NGAL；Cystatin C；糖尿病肾病；早期诊断
Abstract：Objective Explore the type 2diabetes mellitus（T2DM）patients serum NGAL，Cystatin C change and to the diabetes nephrosis（DN）earlydiagnosis of clinical significance.Methods Selection type 2diabetes mellitus（T2DM）in 80cases，According to the urinary albumin excretion rate（UAER）intothree groups，Is temperamental predominance proteinuria（making）group of 20cases，trace qing proteinuria（MA）group 35examples，clinical disease（CN）group in 25；Select the same period the kidney disease patients 20cases as control group.Application ELISA detection of patients with urinary NGAL（uNGAL）level Application immune rate than scattering turbidity method to detect serum Cystatin C level，analysis and the Cystatin urine NGAL C level and estimated glomerular（GFR）the relationship between.Results ①MA group，CN groups of patients NGAL urine and serum Cystatin C level than control group，the difference was statistically significant increased（P<0.01），including CN groups of patients NGAL urine and serum Cysta tin C level is the highest for respectively 95.56+/-32.68ug/Land（4.73±1.62mg/L.（2）Pearson correlation analysis：patients with diabetes NGAL urine and serum Cystatin C level and do all negative correlation（P<0.05），and NGAL and the correlation of urine do more closely.Conclusion Diabetic patients with urinary NGAL do have good correlation，urine NGAL and serum Cystatin C is sensitive and accurate diagnosis of early DN index，is expected to used for clinical monitoring.
Key words：NGAL；Cystatin C；Diabetic nephropathy；Early diagnosis
中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（NGAL），近年有研究认为该蛋白有可能参与糖尿病的发生发展。研究表明其不仅参与多种肾脏病变过程中表现突出，还参与肾脏形态的形成及修复。胱抑素C（Cystatin C）是一个比较接近理想的内源性指标。本研究检测DN患者尿NGAL和血清Cystatin C水平，并评价它们对DN早期诊断的意义。
1资料与方法
1.1一般资料 按WHO的糖尿病诊断和分型标准，收入我院2011年1月～4月2型糖尿病（T2DM）患者80例。按照尿清蛋白排泄率（UAER）分为正常清蛋白尿（NA）组20例，UAER<20Lg/min，男12例，女8例，平均年龄（55.5±8.2）岁；微量清蛋白尿（MA）组35例，20 Lg/min[UAER[200Lg/min，男12例，女13例，平均年龄（58.3±7.6）岁；临床肾病（CN）组25例，UAER>200Lg/min，男11例，女14例，平均年龄（61.3±6.4）岁。对照组选取20例无其它的疾病，男12例，女8例，平均年龄（56.5±5.8）岁。
1.2方法 标本收集清晨采取受试者静脉血3ml，与促凝管中，4000r/min离心10min，取上清液取上清液存于-80℃冰箱保存。同时收集晨尿5m，l置于试管中，4000r/min离心15min，取上清液置于离心管中，冻存于-80℃冰箱中。
1.3实验方法 血清Cysta tin C采用美国美国贝克曼DXC800生化分析仪，试剂使用宁波美康，采用免疫速率透射比浊法测定，严格按说明书进行操。尿NGAL水平用ELISA方法检测，ELISA试剂盒购自上海沪峰ELISA专卖，实验步骤按试剂盒说明书进行操作。根据标本的吸光度值，计算出各标本相应的NGAL浓度。
1.4统计学方法 采用SPSS 1310软件进行统计分析。所有计量资料以（x±s）表示。尿NGAL和血清Cystatin C水平与GFR的相关分析采用线性回归分析及person直线相关分析。
2结果
2.1糖尿病组与对照组患者各检测指标比较 NA组患者的各种指标均正常，CN组患者的UAER较其他各组均升高（P<0.01），MA组患者的UAER较对照组明显升高（P<0.01）。MA组及CN组的血清Cysta tin C与对照组相比，具有统计学意义，（P<0.05，见表1）。NA组、MA组、CN组患者的尿NGAL（uNGAL）水平均较对照组高，随着UAER的增加而逐渐升高，差异有统计学意义（P<0.01）。各组患者尿NGAL和血清Cystatin C的水平见表1。
2.2相关性分析 T2DM患者尿NGAL水平与GFR水平呈显著负相关（r=-0.312，0.4510；P<0.05）；血清Cystatin C水平与GFR水平呈显著负相关（r=-0.4120，P 3讨论 近年来，糖尿病（DM）被认为是一种慢性、低度炎症的亚临床过程，NGAL蛋白作为一种新的急性时相反应蛋白，作为1种炎性因子参与糖尿病的发生发展。目前，糖尿病肾病已是终末期肾衰的首位病因，所以对糖尿病肾病早期诊断及治疗的研究具有重要的意义。目前以反映肾小球损伤为主的实验室指标诊断DN敏感性不高，所以难以及时准确的发现早期肾脏损伤。有研究认为，在DN进展中，肾小管损伤要比肾小球损伤出现早[1]。但也有研究认为，糖尿病肾病时肾小管的损伤可能要比肾小球的损伤早[2]，这提示我们可以积极追寻某种能反映肾小管损伤的灵敏指标，从而能及时准确的发现肾脏的早期损伤，为患者减少痛苦。 NGAL是具有类似于转铁蛋白的铁转运功能[3，4]。研究发现，NGAL它不仅是促进肾脏祖细胞转化为肾小管上皮细胞的重要因素[2]，而且在肾脏受损时还能诱导肾小管上皮细胞再生，促进肾功能的恢复[5]。本实验通过检测糖尿病患者尿液中NGAL蛋白的活性，从而了解NGAL在糖尿病肾病进展中的意义，近期研究认为，NGAL主要在近端小管表达，同事也存在于远端肾单位[6]。 作为反映肾小球滤过率（GFR）的指标，血清Cr易受肌肉量、肉食的摄入量及体内代谢水平等许多因素的影响，此外，由于肾脏对血清Cr的代谢有很大的贮备能力，只有当GFR有很大程度的下降时血清Cr的浓度才出现增高。Cy-sC可作为反映GFR（肾小球滤过率）的灵敏标志物，当肾小球出现轻微损伤时，血中CysC浓度即可出现升高，肾脏是清除循环中Cys-C的唯一器官，所以血清Cys-C浓度主要由GFR决定，血清并随着病情的加重而逐渐增高，因此，目前CysC被公认为肾功能早期损伤的标志物之一。Cys-C是一种理想的反映GFR变化的内源性标志物[7]。因此，Cys-C是在特定条件下反映肾脏功能是否正常的有用的筛选工具。Cys-C相对于肌酐是否具有显著性的优势，还需要在其他病组中做更充分的工作。 综上所述，T2DM并发肾损伤患者尿NGAL水平明显升高，且与肾损伤程度相关，血清Cysta tin C水平明显升高，因此，尿NGAL和血清Cysta tin C可以做为判定T2DM并发肾损伤的可靠指标，通过检测T2DM患者尿NGAL和血清Cysta tin C的水平可以为T2DM并发肾损伤的干预和治疗提供一些参考。 参考文献： [1]Gilbert RE，Cooper ME.The tubulointerstitum in progressive diabetic kidney disease：more than an aftermath of glomerular injury[J].Kidney Int，1999，56（5）：1627-1637. [2]Richard E Gilbert，Mark E Cooper：The tubulointerstitium in progressive diabetic kidney disease：More than an aftermath of glomerular injury [J].Kidney International，1999，56：1627-1637. [3]Yang J，Goetz D，Li JY，et al.An iron delivery pathway mediated by a lipocalin.Mol Cell，2002，10：1045-1056. [4]MitsnefesMM，Kathman TS，M ishra J，et a.l Serum neutroph ilgelat i2 nase-associated l ipocalin as a marker of ren al fun ct ion in ch ildrenw ith ch ron ic kidney disease[J].Pediatr N eph rol，2007，22：101-108. [5]MoriK，Lee HT，Rapoport D，eta1.Endocytie delivery of lipocalin-sid erophore-iron comp lex rescues the k idney from ischem ia-reperfu2s ion in jury[J].J Clin Invest，2005，115（3）：610-621. [6]Mori K，Lee HT，Rapoport D，et al.Endocytic delivery of lipocalin-siderophore-iron complex rescues the kidney from ischemia-reperfusion injury，J Clin Invest（2005）115（3）：610-621. [7]Devarajan P.Emerging biomarkers of acutek idney in jury[J].Con trib Neph rol，2007，156：203-212. [8]鲁广建，宋志善，张群妹.血清胱抑素C在百草枯急性中毒早期肾损伤的意义[J].中国急救医学，2009，29（6）：545-547.编辑/孙杰