【摘要】 目的 探討He-Ne激光穴位照射对老年痴呆大鼠血清自由基及血液流变学的影响。方法 用三氯化铝和D-半乳糖建立大鼠脑损伤老年痴呆动物模型，以不同剂量的氦氖激光穴位照射模型，观察大鼠血清自由基水平及血液流变学指标的改变。结果 剂量为20.2J/cm2和50.3J/cm2的氦氖激光穴位照射老年痴呆模型大鼠后，血清中SOD活性明显升高，MDA含量明显降低（P<0.05，P<0.01），血液流变学指标有明显改善（P<0.05）。结论 一定剂量He-Ne激光穴位照射有抗MDA氧自由基损伤和激活SOD抑制脂质过氧化的作用，并能改善血液流变学指标异常，是预防、治疗老年痴呆等中枢神经退行性疾病的有效方法。
【关键词】 He-Ne激光；穴位照射；老年痴呆；自由基；血液流变学
doi：10.3969/j.issn.1004-7484（x）.2014.04.090
文章编号：1004-7484（2014）-04-1885-02
老年性痴呆，又称阿茨海默氏病（Alzheimer‘s Disease，AD）是一种发生于中老年的原发性中枢神经系统退行性疾病。现有的大量研究表明，老年痴呆等神经元退行性疾病与脑组织氧化应激具有密不可分的联系。AD的病因和发病机制目前尚不清楚，但越来越多的研究发现氧自由基的产生与AD有关，并认为氧化应激在AD发生、发展中起关键作用[1]。低强度激光具有消炎、镇痛、抗氧化和调节免疫等多种生物学作用，作为一种非药物治疗手段已被广泛应用于中枢神经系统疾病的防治。本研究分别测定治疗前后血清超氧化物歧化酶（SOD）活性、丙二醛（MDA）含量变化及血液流变学指标的改变，以探讨He-Ne激光体外穴位照射对AD患者自由基的清除作用及对血液流变学的影响，为He-Ne激光用于AD治疗提供有利的科学理论依据。
1 材料与方法
1.1 动物 健康成年雄性SD大鼠40只，体重（200±20）g，清洁级，购自内蒙古大学实验动物中心。
1.2 仪器与试剂 HJ-1B型氦氖激光器（南京激光仪器厂），He-Ne激光功率计（北京物科光电公司），752C紫外可见分光光度计（上海第三分析仪器厂），混匀器（上海伟业有限公司），MVIS-2030全自动血液流变分析系统，超氧化物歧化酶（SOD），丙二醛（MDA）测定试剂盒（南京建成生物工程研究所）；D-半乳糖，六水三氯化铝（东台市永泰化工有限公司）。
2 方 法
2.1 分组及AD大鼠模型制备 实验大鼠随机分为4组，即对照组、模型组、激光高低剂量照射组，参考Fattorettip等人及国内外的相关文献[2-3]，采用腹腔注射D-半乳糖及皮下注射三氯化铝复制AD模型。对照组注射等量生理盐水，AD模型组及激光照射组大鼠腹腔注射D-半乳糖（用注射用水稀释成1%的溶液）60mg/kg，造成亚急性衰老，皮下注射Alcl3（用注射用水稀释成1%的溶液）100mg/kg。每日1次，共40天，诱导复制AD模型。
2.2 激光照射 激光波长为632.8nm，输出功率为22mW，以两种不同剂量20.2J/cm和250.3J/cm2进行穴位表面照射；激光照射穴位定位参照大鼠常用针灸的百会、大椎穴位。激光照射1次/d，30min/次，连续照射1周为1个疗程，疗程间隔3天，2个疗程后观察血清的自由基水平及血液流变学指标的变化。对照组及模型组大鼠不进行激光照射。在第15d断头处死大鼠，取血10ml左右，3000r/min离心10min，分离出血清，置-20℃保存备用。
2.3 指标的测定 将-20℃保存备用的血清样品，置于冰水浴中融化，按建成生物工程研究所提供的方法。SOD含量测定采用黄嘌呤氧化酶法；MDA含量采用（TBA）法；全血粘度的测量利用血液全自动分析仪，于25℃恒温下测定高低切变率下血液粘度、红细胞聚集指数及红细胞的变形指数。
2.4 统计学处理 数据采用SPSS11.0统计软件进行分析。检测结果用χ±s表示，组间比较采用t检验，P<0.05为差别有统计学意义。
3 结 果
3.1 血清SOD活性及MDA含量的改变 模型组大鼠血清SOD含量显著低于对照组（P<0.01），血清MDA含量与对照组相比显著升高（P<0.01），激光高低剂量治疗组和模型组相比，SOD含量明显升高（P<0.05，P<0.01），MDA含量明显降低（P<0.05，P<0.01），激光高剂量组最为显著。说明一定量的He-Ne激光穴位照射具有明显的抗氧化及抗自由基损伤作用，见表1。
4 讨 论
AD等神经元退行性疾病发病机理复杂，其中氧自由基引起的过氧化损伤被认为是AD等老年疾病发病的重要因素。MDA是脂质过氧化的产物，其含量的变化可间接地反映组织中氧自由基含量变化和氧自由基对机体的损害程度。超氧化物歧化酶SOD是机体天然的自由基清除剂，清除并阻止由氧自由基引发的自由基连锁反应[4]。人体内氧化自由基的生成使SOD活性下降，导致膜脂质发生过氧化损伤。本实验中模型组与对照组相比，大鼠血清SOD活性下降，MDA含量升高，表明三氯化铝和D-半乳糖致老年痴呆模型大鼠的血清自由基产生增多，机体清除氧自由基的能力下降。He-Ne激光高低剂量组大鼠血清中MDA的含量较痴呆模型组都明显降低，SOD含量明显升高，激光高剂量组最为显著。实验表明一定剂量的激光穴位照射能减少氧自由基的产生，增强清除氧自由基的能力，减轻氧自由基引起的脑组织损伤，起到保护神经细胞和防止脑老化的作用。
大量临床观察显示AD患者伴高脂血症、血液流变学异常明显高于同龄健康人。因此，调节脂代谢紊乱，降低血液黏滞度已成为防治AD的主要措施之一。本文采用激光照射大鼠模型的百会、大椎穴位的方法，观察激光对模型大鼠血液流变学的影响，实验表明He-Ne激光高剂量穴位照射组对模型大鼠的血液流变学指标有明显改善作用。说明一定剂量的激光穴位照射能改善微循环，增加脑血流量，减少缺血性损伤，促进缺血缺氧神经细胞功能的恢复。
参考文献
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