摘要 目的：对RA患者免疫炎症细胞及细胞因子间的作用机制进行分析和研究。方法：对临床上50例RA患者血液样本与25例对照组的血液样本进行对比。结果：RA患者中的骨桥蛋白（OPN）的表达水平显著高于对照组，表达指数水平高达8.2，是对照组的8倍。对RA患者的关节液进行检测发现IL—12、IL—18、IL—10等细胞因子的水平显著高于对照组。结论：在RA患者中的发病机制是OPN以细胞因子或调控因子的方式参与到RA的发病过程中，对OPN细胞及其受体因子的研究可为RA患者新药的开发及治疗提供新的途径。
关键词 类风湿关节炎细胞因子作用机制
doi：10.3969/j.issn.1007—614x.2012.28.007
类风湿关节炎（RA）是一种自身免疫反应的疾病，目前临床对RA患者并没有特效的疗法，主要以激素治疗和对症治疗为主，而对于RA患者发病机制的研究一直是国际上研究的热点[1]。2010年1月～2012年1月收治RA患者50例，对其免疫细胞及细胞细胞因子的作用机制进行分析与研究，现报告如下。
资料与方法
选取50例确诊为RA的患者作为研究对象，年龄38～55岁，其中男35例，女15例，病程3～8年，患者诊断按美国风湿疾病委员会制定的标准。选取25例非RA患者作为对照组，对照组男15例，女10例，年龄35～58岁。两组在临床资料上不存在差异性（P>0.05）。
方法：OPN水平的检测：采用已包被了抗体的孔板，孔板洗净后，在孔板上滴加OPN标准样品，并将样品置于37℃的恒温箱中1小时，恒温结束后将样品洗涤7次，完毕后在每孔中加入0.1ml的标记抗体，并置于4℃冰箱中进行恒温半小时。时间到点后，于每孔中加入0.1ml的显色液，并于每孔中加入0.1ml的终止液，并于波长450nm的酶示仪上进行读数[2]。
细胞因子的检测：IL—12、IL—18、IL—10采用ELISA酶联免疫反应检测。
结果
RA患者中的OPN值显著高于对照组的患者，ELISA酶联结果显示，RA患者中的OPN水平远远高于对照组（P<0.05），见图1。
图1 RA患者OPN值与对照组的比较
IL—12、IL—18、IL—10的水平RA组高于对照组（P<0.05），且IL—12、IL—18、IL—10的水平含量随OPN值的增高而上升。见表1。
表1两组IL—12、IL—18、IL—10的水平比较（pg/ml）
组别IL—12IL—18IL—10RA组250550118对照组1025022
讨论
RA病理特征为关节滑膜出现慢性的炎症，主要表现为在关节滑液积聚了大量的炎症细胞及细胞因子，从而使得T淋巴细胞、巨噬细胞被激活，从而引起骨膜组织增生，形成新的血管。新增的骨膜组织具有能破坏酶细胞的介导，损害关节部位。国内外不少的资料显示，RA属于异质性疾病[3]。
RA作为自身免疫异常的疾病，其自身的抗原机理还不是十分明确。因此本研究通过ELISA酶联法对患者的关节液中的OPN及细胞因子水平进行分析，发现在RA患者中的OPN及细胞因子的水平明显高于非RA的患者。OPN在关节液中的水平含量达到15.2μg/ml，而IL—10、IL—12、IL—18含量也显著地提高。由于OPN受体十分复杂，家族里的结构相似的分子有多种，OPN分子中含有多个功能域，表现为RGD与整合素结合，通过这些功能结构，OPN可以与纵多的受体结合，当它与细胞表面分子结构结合时可以促进细胞迁移、黏附以及转导细胞信号。相关文献报道，在小鼠体内OPN对巨噬细胞表达具有抑制作用，其发生的机制主要是与受体CD44相关。在CD4基因被剔除的小鼠中发现IL—12的表达仍然受OPN的影响。CD44基因可阻断OPN对IL—10的抑制作用，在不含有CD44基因的小鼠中发现，IL—10的水平显著升高[4]。
影响OPN对细胞影响的因素有多种，本实验的结果只是初步证明OPN对受体的表达主要存在骨膜组织上，而CD44基因主要是骨膜组织中表达。但关于OPN与受体如何结合发挥作用，还需要进一步进行研究。
参考文献
1徐晓玲，梁瑞霞，黄君健，黄翠芬.细胞因子在类风湿关节炎发病机制中的作用[J].生物技术通讯，2008，1：112—113.
2张媛，邵福灵.类风湿关节炎患者血清及滑膜转化生长因子—β1含量变化与临床意义[J].临床荟萃，2007，3：221—222.
3光平，观美华.类风湿关节炎患者细胞因子的检测及其意义[J].中华全科医学，2009，7：58—59.
4张蓉，刘秀梅.CD4～+CD25～+Treg细胞表面CTLA—4及血清IL—10、TGF—β1在类风湿关节炎中的表达及意义[J].中国现代医生，2010，19：99—100.
9周秀艳，侯振江，邢桂芝.血清C反应蛋白与2型糖尿病肾病的关系[J].中国老年学杂志，2007，27（8）：792.
10Juan F，Gonzalez N，Mora—Femandez CM.The role of inflammatory cytokines in diabetic nephropathy[J].J Am Soc Nephrol，2008，19（3）：233.
11Niewczas MA，Ficociello LH，Johnson AC，et al.Serum concentrations of nonproteinuric patients with type 1 diabetes.Clin J Am Soc Nephrol，2009，4：62.
12Dessapt C，Baradez MO，Hayward A，et al.Mechanical forces and TGFbetal reduce podocyte adhesion through alpha3betal integrin dowegulation.Nephrol Dial Transplant，2009，24：2645.
13Zhang Z，Peng H，Chen J，et al.MicroRNA—21 protects from mesangial cell proliferation induced by diabetic nephropathy in db/db mice.FEBS Lett，2009，583：2009.
14Tan Y，Keum JS，Wang B，et al.Targeted deletion of B2—kinin receptors protects against the development of diabetic nephropathy.Am J Physiol Renal Physiol，2007，293：1026.