摘要：观察了12名省队赛艇运动员在30天高住高练低训（HiHiLo）期间网织红细胞参数的动态变化。结果显示： Ret%与Ret# 在低氧训练初期就出现显著升高。CHr从低氧训练开始至低氧训练结束第12天始终维持在高水平，MCVr的变化趋势与CHr类似。IRF-M+H的变化以下降为主。结论：CHr可以直接快速地反映骨髓红系细胞合成血红蛋白的水平，在机体造血原料充足的前提下，它可作为低氧刺激骨髓红系增生效应的敏感指标。Ret%和Ret# 可作为低氧增强骨髓红系造血功能的参考指标。
关键词：高住高练低训（HiHiLo）；低氧训练；网织红细胞参数
中图分类号：G804.5文献标识码：A文章编号：1004-4590(2008)06-0052-04
Abstract:
Abstract: This study investigated the effect of HiHiLo on reticulocyte parameters. The results demonstrated that CHr increased significantly during all the days of the test and Retic increased significantly at 1st-3rd days of the test period. This finding suggested that CHr and Retic are sensitive indices about erythropoietic function of marrow and activity of erythrocyte.
Key words: HiHiLo; hypoxic training; reticulocyte parameters
低氧训练的重要生理效应之一就是通过促红细胞生成素的分泌增加，刺激骨髓造血机能。促进骨髓内红细胞系列的释放，使外周血液中红细胞和血红蛋白含量升高，最终通过增加氧运输量达到提高机体有氧能力的目的。网织红细胞（网红）是骨髓中造血干细胞生长发育为成熟红细胞过程中所经历的一个重要阶段，是从晚幼红细胞脱核后，在即将发育为成熟红细胞之前胞浆内尚残存RNA的红细胞。与成熟红细胞参数相比，网红的参数指标更直接地反应了骨髓红系造血机能的盛衰，能够更早期、更全面地反映低氧训练对于红细胞生长发育的影响。本文观察了12名赛艇运动员在30天低氧训练期间网红参数指标的动态变化规律，旨在为有关评价和研究低氧训练的效应提供参考。
1 研究对象与方法
1.1 实验对象
省级赛艇运动员共12名，其中男子轻量级运动员7人，身高184±1.83cm，体重73.71±1.50kg，年龄20.43±0.98岁；女子公开级运动员5人，身高179.80±2.17cm，体重72.20±5.02kg，年龄20.60±0.89岁。运动员为世居平原人群，以往未上过高原，未接触过低氧环境。身体健康，无血液系统疾病史。
1.2 低氧暴露及训练方式
采用高住高练低训（HiHiLo）模式。为期30天。实验期间受试者每天20:00至次日6:00在低氧房（德国L.O.S公司）睡眠，低氧卧房海拔高度设为2500米。每周两次在海拔2100米高度低氧条件下进行赛艇测功仪（Concept II）训练, 要求各人以平原本人测功仪6000米最大强度（瓦）的65％强度划行10000米距离，（时间约为31-36分钟，血乳酸水平3-6mM）。其余日常训练仍在平原环境下进行。
1.3 网红参数的测定
分别于实验前、实验第1、3、6、9、13、16、21、23、27、30天和实验结束后第5、12天，共计13次采集血样。于早晨6:30, 安静空腹状态下，肘前静脉抽血约2ml, 加入含EDTA的抗凝管中混匀。所有样本在采血后0.5至4小时上机完成测试。使用德国Bayer公司生产的ADVIA120全自动六分类血球分析仪及其该公司生产的配套试剂，严格按照仪器操作规程进行检测。
检测指标：（1）网红计数和分群参数：网红百分比（Ret%）、网红绝对值（Ret#）、高荧光网红（HFR）、中荧光网红（MFR）、低荧光网红（LFR）、未成熟网红（IRF-M+H）。（2）网红血红蛋白参数：网红血红蛋白含量（CHr）、平均红细胞体积（MCV）、网红血红蛋白浓度（CHCMr）。（3）成熟红细胞参数：红细胞血红蛋白含量（CH）、红细胞计数（RBC）、血红蛋白（Hb）、红细胞压积（Hct）。
1.4 数据处理
运用SPSS10.0统计软件，与实验前的差异比较采用配对T检验，显著性水平为p＜0.05。实验数据以“均数±标准差”表示。
2 结 果
实验结果如下页表1所示。
2.1 网红计数和分群参数的变化
与实验前相比，Ret%与实验后第1天就出现了显著升高，第3天进一步升高。 Ret#于实验后第3天出现显著升高，随后有所下降，但仍维持高于实验前水平的趋势，直至低氧训练结束。HFR、MFR、IRF-M+H均表现为实验第一天出现明显下降，其中HFR至实验第13天恢复至实验前水平， MFR、IRF-M+H于实验第3天恢复至实验前水平。LFR于实验第一天出现明显升高，随后即下降至实验前水平。
2.2 网红血红蛋白参数的变化
与实验前比较，CHr和MCV从实验第1天开始即出现显著增加，并且在整个低氧训练实验过程中始终维持在高于实验前的水平。CHCMr水平于实验的第3至第9天明显低于实验前，随后逐渐升高，在实验第21天和实验后第5、第12天升高达显著性水平。
2.3 红细胞参数变化
RBC和Hb在实验过程中变化较少，仅实验第16和第30天出现一过性显著升高。CH至实验的第6天无显著变化。于实验的第9和第13天出现显著性下降。以后转为升高，于实验的第27天、第30天和实验后第12天达显著性升高。
3 讨 论
低氧训练对红细胞系统生长发育的影响是目前运动医学界研究的热点之一。在大量的相关研究报道中，研究结果存在较大差异。有研究结果显示低氧训练能够促进红细胞的生成，使Hb含量明显升高，但升高的幅度和升高发生或维持的时间各有不同。也有研究未发现RBC、Hb含量明显升高。产生上述现象的原因除了各项研究的低氧度、训练强度、受试者训练水平等控制条件不同外，另一个重要因素就是红细胞的生长周期较长，它的生长发育受到诸多因素的影响，使它对低氧训练反应的表现有时变得迟钝或不确定。
低氧通过刺激促红细胞生成素（EPO）的释放（1），增强骨髓造血干细胞的活性，促进骨髓红系细胞的生长、分化和增殖，使红系池扩大。由于红细胞的寿命较长，为120天，而且其生长发育成熟以及破坏过程受到诸如铁、叶酸、维生素B12、蛋白质等合成原料和细胞合成基因调控等多种因素的影响，这样就导致低氧对于骨髓红系造血的刺激效应往往不能通过Hb和RBC等成熟红细胞的参数及时、准确地反映出来。
网织红细胞（网红）是血中新生红细胞的标志，它反映了骨髓有效制造和释放红细胞的能力。网红寿命短，仅为1至2天，网红的参数可随骨髓红系造血机能的变化而及时变化。因此，网红参数可用于对骨髓红系造血活性进行实时同步监测。随着自动化网址红细胞分析技术的发展，网红参数因其具有上述的优点，目前在临床已被作为各类贫血的早期诊断和疗效观察的先进手段。网红参数的引入无疑也为低氧训练生理效应的研究提供了一个新途径。
本研究对12名省专业队赛艇运动员在30天HiHiLo实验期间的网红参数进行了较为密集的观测。其中包括实验前1次，实验中10次和实验后2次。希望能得到有关低氧训练期间网红参数动态变化的较详尽的数据。本研究结果显示，低氧训练第一天后Ret%即出现显著增加，到低氧训练第三天时Ret%和Ret#均出现明显升高。随后仍维持在较高水平，提示该指标在低氧训练初期变化较为敏感， 可作为低氧增强骨髓红系造血功能的参考指标。
本研究的一个明显的发现是，从低氧训练开始第一天后直至低氧训练结束后第12天这一阶段里网织红细胞血红蛋白含量（CHr）几乎始终保持于显著高于实验前的水平。另一项参数MCVr也呈类似改变。CHr被认为是网织红细胞的一个重要的参数，在数值上CHr是MCVr与CHCMr的乘积（3）。它可直接、快速地反映骨髓红系细胞合成血红蛋白的水平。在铁缺乏初期，骨髓中铁储存量减少时，通过CHr的检测可发现最早期发生的网织红细胞合成Hb下降，同样，在补充铁剂有效后1天CHr即可反映早期的Hb合成增加（2）。由此可以推论，低氧训练中CHr持续维持在较高水平是在机体造血原料充足的情况下，骨髓红系细胞合成血红蛋白旺盛的表现，是低氧训练促进骨髓红系增生的体现。在某种意义上可以这样认为，Ret%和Ret#是从数量方面来体现骨髓造血活性，CHr则是从细胞内在质量方面来体现骨髓造血活性。本研究结果提示在机体造血原料充足的前提下，CHr可作为低氧刺激骨髓红系增生效应的敏感指标。
网红分群指标是ADVIA120全自动六分类血球分析仪将检测到的所有网织红细胞根据其胞浆的荧光染色强度（与细胞内的残留的RNA含量成正比），进一步将分为高荧光网红（HFR）、中荧光网红（MFR）和低荧光网红（LFR）三类。其中LFR因其胞浆内RNA含量较少，荧光染色强度较弱。HFR因其胞浆内RNA含量较多，荧光染色强度较强。MFR胞浆内RNA含量以及荧光染色强度介于LFR和 HFR之间。幼稚程度越高的网红，其胞浆内RNA含量越高，荧光强度也越高。骨髓造血活性增加时，有大量较为幼稚的网红进入外周血液中，使HFR和MFR指标明显升高（4）（5）。未成熟网红（IRF-M+H）就是由HFR与MFR相加之后派生出来的指标。上述网红分群指标是在网红计数基础上，通过进一步测定外周血液中不同幼稚程度网织红细胞数量的比例来反映骨髓红系细胞的增生活跃状态，被认为也是代表骨髓造血活性的敏感指标。在临床已开始用于血液病的诊断和疗效评估（4）。
目前有关低氧训练对网红分群指标影响的研究较少。有研究发现：HiHiLo组运动员在第5天出现了IRF-M+H的明显升高，LoHi组运动员在第26天出现了IRF-M+H的明显升高。提示IRF-M+H是机体对低氧训练反应的敏感指标（6）。另有研究结果显示：游泳运动员在海拔1890米进行了为期3周半的高原训练后HFR、MFR、LFR和IRF-M+H没有显著性改变（7）。本研究也没有发现网红分群指标在低氧训练中和低氧训练后产生显著升高。相反，在实验第一天起还出现HFR与MFR的一过性显著下降和LFR显著升高。上述不一致的研究结果提示网红分群指标的影响因素较多，首先要考虑的是低氧度、训练强度、个体对低氧刺激的敏感性（包括初次接触低氧和多次接触低氧）和测定方法等因素。有关的作用机制有待进一步研究。
成熟红细胞参数中RBC和Hb仅在低氧训练的第16天和第30天较实验前有显著升高，其余时间无明显变化，提示它们对于低氧训练反应的敏感性和特异性较差，不宜将其单独用来评价低氧训练效应。CH作为与CHr相对应的成熟红细胞参数，它反映成熟红细胞中的血红蛋白含量，由于红细胞寿命可达120天，CH指标对于导致血红蛋白合成盛衰的因素反应迟缓。有文献报道缺铁性贫血时CH 的下降明显晚于CHr等指标，在补铁治疗后CH 3周后CH才开始升高（8）。在本研究中CH 在低氧训练的第27天才开始出现明显升高，明显晚于CHr，两者形成了鲜明的对照。
4 结 论
4.1 CHr可以直接快速地反映骨髓红系细胞合成血红蛋白的水平，在机体造血原料充足的前提下，它可作为低氧刺激骨髓红系增生效应的敏感指标。
4.2 Ret%和Ret# 可作为评价低氧刺激骨髓造血功能的参考指标。
参考文献：
［1］ Koitinen PO,et al. EPO, red cells, and serum transferring receptor in continuous and intermittent hypoxia. Med Sci Sports Exerc. 2000,32 (4):800-804.
［2］ 王建中. 网织红细胞血红蛋白含量测定诊断铁缺乏研究进展. 中华检验医学杂志，2005，28（12）：1324-1326.
［3］ 王建中. 网织红细胞血红蛋白含量是判断铁缺乏有价值的指标. 诊断学理论与实践，2007，6（4）：296-298.
［4］ 乐家新等. 网织红细胞计数与分群测定及临床应用探讨. 临床检验杂志，2003，21（4）：231-233.
［5］ 陈晓冰等. 自动化网织红细胞分析技术及其相关指标的临床应用. 国外医学 输血及血液学分册，2002，25（4）：341-343.
［6］ 刘媛媛等. 网织红细胞在低氧训练中变化规律的研究. 体育科学，2006，26（1）：49-52.
［7］ 樊云彩等. 高原训练对提高游泳运动员红细胞生成效果的研究. 体育科学，2006，26（5）：53-55.
［8］ 乐家新等. 新型网织红细胞参数在缺铁性贫血疗效观察中的应用. 临床检验杂志，2002，20（1）：15-16.