摘要：目的研究穿心莲内酯注射液对链脲菌素（STZ）所致的1型糖尿病大鼠血糖、血清谷胱甘肽过氧化物酶（GSHPX）、超氧化物歧化酶（SOD）及肾胰岛素样表皮生长因子1（IGF1）蛋白表达的影响及意义。方法腹腔注射1% STZ建立1型糖尿病大鼠模型。将模型组大鼠分为模型对照组、模型给药低剂量组[100 mg/（kg·d）]、模型给药高剂量组[200 mg/（kg·d）]3组，腹腔注射给药2周后，断尾采血检测各组大鼠血糖，生物化学法检测大鼠血清GSHPX、SOD变化，HE染色检测大鼠肾脏形态学改变，免疫组织化学法检测大鼠肾IGF1表达变化。结果模型对照组与正常对照组相比，大鼠血糖明显升高，血清GSHPX含量明显下降，SOD活性明显下降（P<0.05）。低、高剂量给药组与模型对照组相比，大鼠血糖下降，血清GSHPX含量显著增加，SOD活性增高。模型对照组肾小球体积增大，肾小球系膜基质增生、系膜细胞增殖、肾小球毛细血管袢及肾小管基膜增厚。药物高浓度组肾脏组织形态学改变介于正常对照组和模型对照组之间。IGF1蛋白主要在除肾小球以外的肾小管上皮细胞胞浆内表达。较正常对照组，模型对照组IGF1蛋白表达明显减少；高剂量组较模型对照组IGF1蛋白表达增加。结论穿心莲内酯注射液能降低1型糖尿病大鼠血糖，其降血糖作用与其增加抗氧化酶GSHPX含量、提高SOD活性有关，并且可能与上调IGF1表达、激活受体酪氨酸激酶通路有关，具体机制还有待深入研究。
关键词：糖尿病；穿心莲内酯；血清谷胱甘肽过氧化物酶；超氧化物歧化酶
中图分类号：R587R285文献标识码：A
doi：10.3969/j.issn.16721349.2014.11.032
文章编号：16721349（2014）11136802
糖尿病（DM）是由各种致病因素如遗传、感染及其产生的各种毒素、免疫缺陷等作用机体，造成胰岛β细胞损伤导致胰岛素分泌不足及（或）机体产生胰岛素抵抗所引起疾病[1]。1型糖尿病（IDDM）是一种自身免疫性疾病，又被称为“胰岛素依赖型糖尿病”，多见于儿童和青少年，约占糖尿病患者的15%。
穿心莲为常用中药，具有清热解毒、凉血消肿的功效；临床上主要用于上呼吸道感染、急性菌痢、胃肠炎、感冒发热、抗肿瘤、抗生育及抗高血压等心血管方面的治疗，对降血糖作用报道比较少[2]。穿心莲内酯是从植物穿心莲叶中提取的化合物，主要包括脱水穿心莲内酯、新穿心莲内酯、去氧穿心莲内酯[3]。本课题通过生物化学检测法、HE染色、免疫组织化学法检测穿心莲内酯注射液对1型糖尿病大鼠血糖、血清谷胱甘肽过氧化物酶（GSHPX）、超氧化物歧化酶（SOD）、
胰岛素样表皮生长因子1（IGF1）蛋白表达的影响及可能机制的研究，进而为后续进入临床研究奠定理论和实验基础。
1材料与方法
1.1实验动物健康雄性清洁级SD大鼠60只，体重200 g～250 g，购于山西医科大学实验动物中心。所有大鼠均适应性喂养1周后进行实验。
1.2药品与主要仪器穿心莲内酯注射液（四川玉鑫药业有限公司，批号20130321）；链脲佐菌素（STZ）（Merck公司，批号582302）；三诺安稳血糖仪和试纸条（长沙三诺生物传感技术股份有限公司）；谷胱甘肽过氧化物酶测定试剂盒（南京建成生物工程研究所）；
作者单位：1.山西医科大学汾阳学院解剖学教研室（山西汾阳 032200），Email：1055166149@qq.com；2.山西医科大学汾阳学院形态实验室
SOD测定试剂盒（南京建成生物工程研究所）；IGF1兔抗大鼠多克隆抗体（美国Santa Cruz，批号SC689）；SV002两步法免疫组化检测试剂盒、DAB显色试剂盒（北京中杉金桥生物技术有限公司）。
1.3实验方法
1.3.1建立糖尿病大鼠模型将60只大鼠适应性饲养一周后禁食24 h断尾采血测空腹血糖，随机选10只作为正常对照组，正常组注射STZ的稀释溶剂。其余50只大鼠注射1% STZ 50 mg/kg，7 d后禁食24 h测空腹血糖，血糖>16.7 mmol/L者视为模型成立（每组至少10只）。
1.3.2分组与用药选成模大鼠36只，随机分为糖尿病模型对照组、穿心莲内酯低剂量组[100 mg/（kg·d）]、高剂量组[200 mg/（kg·d）]3组，每组12只。正常对照组和糖尿病模型对照组给予等体积的生理盐水。连续给药2周后禁食24 h。
1.3.3大鼠血糖、GSHPX、SOD的检测用罗氏血糖仪断尾检测大鼠空腹血糖。给药结束后，10%水合氯醛麻醉大鼠，GSHPX化学比色法检测血清中GSHPX含量、SOD活性的变化。
1.3.4HE染色观察大鼠肾脏形态变化断尾检测各组大鼠空腹血糖后，常规麻醉大鼠，取出肾脏组织，用4%多聚甲醛固定24 h制成蜡块切片，切片常规脱蜡，苏木精染细胞核，伊红染细胞质，梯度酒精脱水，二甲苯透明后中性树胶封片，镜下观察各组大鼠肾脏形态。
1.3.5免疫组织化学法检测IGF1蛋白表达取大鼠肾脏石蜡切片脱蜡至水，抗原修复，3%H2O2去离子水封闭，PBS洗涤，抗原修复、封闭后滴加一抗、二抗、DAB显色，自来水中止，苏木素复染，脱水，透明，树胶封片。
1.4统计学处理采用SPSS11.5处理。计量资料以均数±标准差（x±s）表示，组间比较采用单因素方差分析，P<0.05为有统计学意义。
2结果
2.1大鼠血糖、血清GSHPX含量、SOD活性比较（见表1）