对照药阿司匹林，以血液流变学、凝血4项指标、四诊信息（爪、尾、舌数码拍照；体温检测；体重；摄食量；心电图采集；旷场自主活动）、证候积分综合评价模型。结果：与正常组相比，模型组在血液流变学、凝血4项指标、动物行为学、体重、饮食量、证候积分、心率方面均有明显变化；拍摄舌象、爪像经Photoshop 7.0分析所得大红色（r）、绿色（g）、蓝色（b）的百分含量与正常组相比有显著性差异；阿司匹林及香附四物汤给药组在血液流变学、凝血4项、动物行为学、体重、饮食量、心率、证候积分及舌、尾r，g，b有显著改善作用，而少腹逐瘀汤未见明显改善作用。结论：本文建立了适宜于气滞血瘀证妇科疾病特点的动物模型评价体系，为气滞血瘀证模型评价体系研究提供借鉴。
[关键词] 气滞血瘀证；证候模型；香附四物汤；少腹逐瘀汤
[稿件编号] 20120824011
[基金项目] 江苏省高校自然科学重大基础研究项目（06KJA36022）；江苏高校优势学科建设工程项目（ysxk-2010）；江苏省自然科学基金项目（BK2012456）
[通信作者] *段金廒，博士，教授，博士生导师，Tel：（025）85811116，E-mail：dja@njutcm.edu.cn； *刘培，博士，助理研究员， Tel：（025）85811916，E-mail：liupei@njutcm.edu.cn
[作者简介] 李炜，硕士研究生，E-mail：njlw1218@163.com
中医诊治疾病的基础是证候。证候是对人体疾病病理变化整体反应的概括，是辩证的结果和论治的依据，体现了中医学理论的特色与优势。传统中医证候的确定是建立在四诊（望、闻、问、切）的直观方法基础上，由医家思辨而经验性地形成的，易受外界因素和诊治者主观倾向的影响，其可认知性、可重复性受到限制，具有主观性、模糊性。中医证候实验动物造模不易控制，或直接引用疾病造模方法，缺少准确而有效的鉴定证候特征的途径，给中医临床诊断、疗效评定、新药开发以及国际间交流等造成诸多困难。有研究表明，证候模型动物是可以实现四诊的，而且部分四诊指标是可以标准化、客观化、计量化采集和分析的，这样的四诊信息是可以用于辩证和辩证论治的[1]。
情志与“肝”的关系最为密切，情志异常是肝气郁滞证和气滞血瘀证的主要病因，目前所制作的血瘀证动物模型以肾上腺素短期给药模拟气滞过程，并复合冰水应激的急性血瘀证模型以及单一因素（静注高分子葡聚糖等）造模为主，制模因素过于简单，缺乏量化标准[2]，难以体现中医血瘀证中缓慢的气机郁滞到血瘀的动态时空的变化过程。
故本文以SD雌性大鼠作为试验动物，采用小剂量肾上腺素长期注射法结合慢性不可预见性刺激复制模型，建立适宜于气滞血瘀证妇科疾病特点的动物模型评价体系，提供证候宏观特征量化标准，使用治疗气滞血瘀证和寒凝血瘀证的经典方剂香附四物汤及少腹逐瘀汤反证证候特点。
1 材料
1.1 动物 清洁级雌性SD大鼠，体重180～220 g，由浙江省实验动物中心提供，许可证号SCXK（浙）2008-0033，合格证号0019503。
1.2 试剂 盐酸肾上腺素注射液（Adr），天津金耀氨基酸有限公司，批号1112021；二水合柠檬酸三钠（枸橼酸钠），南京化学试剂有限公司，批号050580052；水合氯醛，国药集团化学试剂有限公司，批号20100709。
1.3 药物 香附四物汤（XFSWD）和少腹逐瘀汤（SFZYD）中地黄、当归、川芎、香附、延胡索、木香、赤芍、肉桂、小茴香、五灵脂、没药、蒲黄、干姜多味药材， 其中当归药材来自甘肃岷县当归GAP种植基地， 其余均购买于南京市药材公司。药材经南京中医药大学段金廒教授鉴定，符合《中国药典》2010年版项下标准。
XFSWD：称取组方药材（5.25 kg），按照地黄-当归-川芎-白芍-香附-延胡索-木香4∶3∶1.5∶1.5∶1.5∶1比例配比；SFZYD：称取组方药材（5.58 kg），按照当归-川芎-赤芍-肉桂-小茴香-五灵脂-没药-蒲黄-延胡索-干姜3∶1∶2∶1∶0.5∶2∶1∶3∶1∶1比例配比。各组方药材均经粉碎至粒径为40目，分别纯水煎煮提取2次，第1次加10倍量水煎煮2 h，第2次加8倍量水煎煮2 h，合并2次煎出液，浓缩至所需浓度，分别作为香附四物汤水煎剂和少腹逐瘀汤水煎剂供试样品。
阿司匹林肠溶片（aspirin），拜耳医药保健有限公司，批号BJ05900。阿司匹林肠溶片先研磨至粉状，配成10 g·L-1。动物给药剂量按体表面积换算系数计算：人临床用量×0.018/200×1 000×临床等效量的倍数。
1.4 仪器 LG-R-80电脑血液黏度测试仪（北京世帝科学仪器公司）；LG-PABER-1凝血因子分析仪（北京世帝科学仪器公司）；佳能EOS 60D单反相机；欧姆龙电子体温计MC-341；强迫游泳水池（自备圆柱水桶，直径60 cm，高度100 cm）、开场箱（自制100 cm×100 cm×100 cm，四周及底部涂黑，底部用白线分隔为20 cm × 20 cm的25个方格）；DHG-9240A型电热恒温鼓风干燥箱（上海精宏实验设备有限公司）。
2 方法
2.1 模型建立及分组 大鼠随机分为5组，每组8只。正常组（C）与实验组同批同条件饲养，群养，不注射Adr，不接受慢性不可预见性刺激；模型组（M）、阳性药组（M+阿司匹林）、香附四物汤组（M+XFSWD）、少腹逐瘀汤（M+SFZYD）组，单笼饲养，14 d皮下注射Adr 0.9 mg·kg-1·d-1[3-4]，4 h后接受慢性不可预见性刺激（A为昼夜颠倒，B为0～4 ℃冰水游泳4 min，C为50 ℃烘箱热烘10 min，D为60 dB噪音刺激3 h，E为悬尾10 min，每次随机给予1种刺激，整个周期中每种刺激各3次）；基于预实验结果，第7天选用XFSWD，SFZYD临床等效剂量的6倍量（22.68，25.38 g·kg-1）进行给药，阿司匹林按0.10 g·kg-1进行给药，正常组和模型组大鼠灌胃给予等体积的生理盐水，给药30 min后造模。于第14天造模后2 h，进行旷场实验，观察各组大鼠行为学的变化。于第15天水合氯醛麻醉后，进行心电图测试，爪、舌、尾数码相机拍照，颈总动脉取血，测定血液流变学相关指标。